Биоэквивалентность лекарственного средства Вазоклин-Дарница, таблетки, покрытые оболочкой, лекарственному средству Липримар®

Цель. В сравнительном рандомизированном перекрестном с четырьмя периодами и двумя последовательностями (по схеме TRTR/RTRT) клиническом исследовании с участием здоровых добровольцев доказать биоэквивалентность (БЭ) лекарственного средства Вазоклин-Дарница, таблетки, покрытые оболочкой 20 мг аторвастатина, производства ЧАО «Фармацевтическая фирма «Дарница»(Украина) по отношению к референтному лекарственному средству Липримар®, таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 20 мг аторвастатина, производства «Пфайзер Менюфекчуринг Шпрехензидуева ГмбХ» (Германия).

Объект и методы исследования. Добровольцы мужского пола однократно натощак принимали тестовые и референтные лекарственные средства в дозе 20 мг аторвастатина (80 мг аторвастатина в течение всего исследования). Образцы крови отбирались в течение 48 часов. Количественное определение аторвастатина в плазме крови добровольцев проводили методом ультраэффективной жидкостной хроматографии с тандемным масс-селективным детектированием (Уэрхем-МС/МС).

Результаты. В анализ фармакокинетических показателей включены данные 37 здоровых добровольцев. Средние значения максимальной концентрации для тестового лекарственного средства Вазоклин-Дарница и референтного лекарственного средства Липримар® составляли 6,739 ± 4,276 нг/мл и 7,172 ± 4,053 нг/мл соответственно, а средние значения AUC0-t - 31,873 ± 28,789 нг‧год / мл 29,279 ± 19,311 нг‧год / мл, соответственно. Границы 90% доверительных интервалов для отношения геометрических средних значений Cmax (81,15% -102,66%) и AUC0-t (94,09% -111,09%) для лекарственных средств Вазоклин-Дарница и Липримар® соответствуют предварительно установленным критериям приемлемости (80,00% -125,00%). Предполагаемые побочные реакции (ПР) наблюдались у 5 добровольцев и были расценены как несерьезные.

Выводы. Доказано биоэквивалентность лекарственного средства Вазоклин-Дарница, таблетки, покрытые оболочкой 20 мг аторвастатина, лекарственному средству Липримар®, таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 20 мг аторвастатина. Оба препарата характеризовались хорошей переносимостью при однократном перорального применения натощак.

Ключевые слова: биоэквивалентность, аторвастатин, таблетки, здоровые добровольцы, генерик, референтный препарат, Уэрхем-МС/МС.

Введение

Рост уровня холестерина липопротеинов низкой плотности (ХС ЛПНП) в крови является основным фактором риска ишемической болезни сердца (ИБС) (Roger VL et al., 2011), что связано с их определяющей ролью в развитии и прогрессировании атеросклероза (Morris PB et al., 2014). Клинические данные свидетельствуют, что рост уровня ХС ЛПНП на 10% сопровождается 20% увеличением риска развития ИБС (Wood D. et al., 1998). Поэтому во многих руководствах по профилактике и лечению сердечно-сосудистых заболеваний соблюдения целевых значений уровня липидов крови, особенно ХС ЛПНП, идентифицировано как ключевой подход по снижению сердечно-сосудистого риска (Fedder DO et al., 2002; Grundy S. et al., 2002 ; Lewis SJ 2011; Reiner Z. et al., 2011; Morris PB et al., 2014).

Сегодня статины являются терапией первой линии для первичной и вторичной профилактики сердечно-сосудистых заболеваний (Jellinger P.S. et al., 2017). Кроме хорошо известных благоприятных кардиоваскулярных эффектов, статины уменьшают риск возникновения инсульта, а также улучшают результативность лечения и прогноз пациентов, перенесших такую сосудистую катастрофу (Zhong P. et al., 2017; Kotlęga D. et al., 2019).

Статины подавляют 3-гидрокси-3-метилглутарил-коэнзим A (ГМГ-КоА) редуктазы - фермент, который катализирует превращение ГМГ-КоА в мевалонат. Блокируя таким образом ранний этап биосинтеза холестерина в гепатоцитах, статины увеличивают в этих клетках экспрессию рецепторов к ЛПНП и, как следствие, интенсифицируют изъятия печенью этого класса атерогенных липопротеинов из плазмы крови (Endo A., 2010; McFarland A.J. et al., 2014).

Аторвастатин, пока что один из наиболее часто применяемых статинов, был изобретен и запатентован Брюсом Ротом в 1986 году и, в дальнейшем, выведен на фармацевтический рынок компанией «Уорнер-Ламберт» в виде препарата Липитор (Roth B.D., 2002). В 2000 году «Уорнер-Ламберт» и Липитор приобретены компанией «Пфайзер», и на сегодня в Украине оригинальный препарат аторвастатина с доказанной эффективностью и безопасностью представлены на фармацевтическом рынке под торговым названием Липримар®, таблетки, покрытые пленочной оболочкой, производства «Пфайзер Менюфекчуринг Шпрехензидуева ГмбХ» (Германия).

Однако недостаточная профилактическая направленность медицинского обслуживания по предупреждению неблагоприятных последствий сердечно-сосудистых заболеваний остается проблемой в Украине (Терендий Н.А., 2015). ИБС в нашей стране занимает ведущее место в структуре смертности населения: почти каждый второй украинец (46%) умирает от ИБС (Гандзюк А.В. и др., 2017), - а 100-110 тыс. Жителей страны ежегодно переносят мозговой инсульт, причем 40 тыс. умирают в результате этой патологии (Волосовець А.А., 2015).

Поэтому для повышения доступности современных средств для предупреждения и лечения сердечно-сосудистых и цереброваскулярных заболеваний ЧАО «Фармацевтическая фирма «Дарница» разработала генерический аналог оригинального препарата аторвастатина - Вазоклин-Дарница, таблетки, покрытые оболочкой 20 мг аторвастатина.

Согласно современным требованиям к регистрации лекарственных препаратов в странах со строгой регуляторной системой в сфере контроля над оборотом лекарственных средств, а также в Украине, одним из ключевых доказательств эффективности генерического лекарственного средства в твердой лекарственной форме (в том числе в таблетках) является подтверждение его биоэквивалентности по сравнению с оригинальным (референтным) препаратом в клиническом испытании с участием здоровых добровольцев (МОЗ Украины, 2005; CPMP / EWP / QWP / 1401/98 / Rev.1 / Corr; СТ-Н МЗУ 42-7.2: 2018).

Важным практическим следствием подтверждения биоэквивалентности генерического лекарственного средства к референтному является возможность экстраполировать установленной по результатам доклинических и клинических исследований эффективности и безопасности референтного лекарственного средства на генерическое лекарственное средство. Соответственно, в условиях доказательства биоэквивалентности, эффекты этих лекарственных средств по эффективности и безопасности являются по сути одинаковыми.

Целью представленного в данной статье клинического исследования является доказать биоэквивалентность лекарственных средств Вазоклин-Дарница, таблетки, покрытые оболочкой 20 мг аторвастатина, производства ЧАО «Фармацевтическая фирма «Дарница» (Украина) и Липримар®, таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 20 мг аторвастатина, производства «Пфайзер Менюфекчуринг Шпрехензидуева ГмбХ» (Германия) путем сравнительного изучения их биодоступности при однократном приеме натощак здоровыми добровольцами.

Объект и методы исследования

Дане клінічне дослідження з оцінки біоеквівалентності проведено відповідно до чинного законодавства України (Верховна Рада України, 1996; МОЗ України, 2005; 2009; СТ-Н МОЗУ 42-7.0:2008; СТ-Н МОЗУ 42-6.0:2008; СТ-Н МОЗУ 42-7.1:2014), міжнародних рекомендацій (OECD, 2004; WHO TRS N 937, 2006; EMA, 2010; 2015; 2016; European Commission, 2013; ICH, 2016) та етичних принципів Гельсінської декларації (Всемирная медицинская ассоциация, 1964). Спонсор даного дослідження — ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця».

Исследуемые препараты

Для проведення дослідження тестовий (Т) лікарський засіб Вазоклін-Дарниця, таблетки, вкриті оболонкою, по 20 мг аторвастатину (у вигляді аторвастатину кальцію), надано компанією ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця». Препарат виробляється у відповідності до міжнародного стандарту Належної виробничої практики (GMP). Як референтний (R) лікарський засіб у даному дослідженні використано Ліпримар®, таблетки, вкриті плівковою оболонкою, по 20 мг аторвастатину (у вигляді аторвастатину кальцію), виробництва «Пфайзер Менюфекчуринг Дойчленд ГмбХ» (Німеччина). Згідно протоколу препарати приймали одноразово натще, після 12-годинного голодування, у разовій дозі 20 мг аторвастатину (1 таблетка).

Субъекты исследования

Клінічна частина дослідження проведена в медичному центрі ТОВ «Клініка ІННОФАР – Україна Інновейтів Фарма Ресерч» (Україна). Для участі в дослідженні запросили 51 добровольця чоловічої статі віком 18–55 років. Після надання інформованої згоди на участь у дослідженні та перевірки на відповідність вимогам критеріїв включення/невключення 40 здорових добровольців продовжили участь у дослідженні. В ході дослідження режим харчування та фізичної активності добровольців було стандартизовано.

Дизайн исследования

Дизайн дослідження — порівняльне рандомізоване перехресне з чотирма періодами і двома послідовностями (за схемою TRTR/RTRT) з «осліпленням» аналітичного етапу дослідження. Схематично дизайн дослідження представлено на рис. 1.

Після проходження скринінгу та рандомізації, у І періоді дослідження здорові добровольці натще одноразово прийняли 1 таблетку лікарського засобу Вазоклін-Дарниця (тестовий препарат «Т») або 1 таблетку лікарського засобу Ліпримар® (референтний препарат «R»). Після періоду «відмивання» добровольці, які в І періоді отримали препарат «Т», в ІІ періоді прийняли 1 таблетку препарату «R», а добровольці, які в І періоді отримали препарат «R», в ІІ періоді — 1 таблетку препарату «Т». У ІІІ і ІV періодах кожний доброволець згідно протоколу отримував той же лікарський засіб, що й у І і ІІ періодах, відповідно (рис. 1). Таким чином, впродовж всього дослідження, сумарно за чотири періоди, кожний доброволець прийняв 80 мг аторвастатину. Тривалість дослідження для кожного добровольця складала не більше 46 днів, включаючи скринінг, І період дослідження, період «відмивання», ІІ період дослідження, період «відмивання», ІІІ період дослідження, період «відмивання», ІV період дослідження й заключний візит.

Аналитическая часть исследования

Для оцінки фармакокінетичних параметрів у здорових добровольців в рамках кожного періоду випробування відібрано 15 проб крові: за 15 хв до одноразового прийому кожного з досліджуваних препаратів і через 10 хв, 20 хв, 0,5 год, 0,75 год, 1 год, 1,5 год, 2 год, 2,5 год, 3 год, 4 год, 6 год, 12 год, 24 год і 48 год після прийому.

Аналітичну частину дослідження та статистичну обробку фармакокінетичних даних було проведено в біоаналітичній лабораторії (БАЛ) ТОВ «Клінфарм» (Україна). Діяльність цієї лабораторії згідно вимог належної лабораторної практики (GLP) сертифіковано словацьким регуляторним органом. Кількісне визначення аторвастатину в плазмі крові здорових добровольців проводили методом ультраефективної рідинної хроматографії з тандемним мас-селективним детектуванням (УЕРХ-МС/МС). При цьому нижня межа кількісного визначення аторвастатину в зразках плазми становила 0,2 нг/мл. Метод валідовано згідно міжнародних та українських рекомендації (Жукова Н.А. и др., 2013; EMA, 2015).

Статистический анализ

В ході статистичного аналізу фармакокінетичних даних побудовано профілі залежності концентрації аторвастатину від часу для кожного препарату і добровольця у вихідних і логарифмічно перетворених одиницях. На основі отриманих експериментальних даних було визначено наступні параметри фармакокінетики (ФК): максимальну концентрацію (Cmax) аторвастатину, час досягнення максимальної концентрації (Tmax), площу під фармакокінетичною кривою з моменту прийому лікарського засобу до останньої точки, що визначається (AUC0–t), площу під фармакокінетичною кривою, екстрапольовану до нескінченності (AUC0–∞), константу швидкості елімінації (Kel) та період напіввиведення (T½). Для показників Cmax, AUC0-t, AUC0–∞ виконано багатофакторний дисперсійний аналіз, що ґрунтувався на змішаній моделі.

Для оцінки біоеквівалентності лікарського засобу Вазоклін-Дарниця, таблетки, вкриті оболонкою, лікарському засобу Ліпримар®, таблетки, вкриті плівковою оболонкою, розраховано 90% довірчі інтервали відношення геометричних середніх значень показників Cmax та AUC0-t, а також AUC0–∞ (додатково для підтвердження оцінки біоеквівалентності). Препарати вважаються біоеквівалентними, якщо верхня і нижня межі зазначених довірчих інтервалів знаходиться в діапазоні від 80,00% до 125,00% (ЕМА, 2010; СТ-Н МОЗУ 42-7.2:2018).

Статистичну обробку ФК-даних виконано за допомогою програмного забезпечення WinNonlin Professional (Pharsight Corporation, США) і Microsoft Excel 2007 (Microsoft Corporation, США).

Оценка переносимости

Переносимість досліджуваних препаратів оцінювали на підставі реєстрації побічних реакцій/побічних явищ (ПР/ПЯ), результатів фізикального та лабораторно-інструментального обстеження.

Результаты и их обсуждение

Дослідження було розпочато після отримання дозволу Міністерства охорони здоров’я України (Наказ МОЗ України № 549 від 27.08.2015 року) та схвалення Комісії з питань етики при ТОВ «Клініка ІННОФАР – Україна Інновейтів Фарма Ресерч».

Під час скринінгу 51 доброволець підписав інформовану згоду на участь в даному дослідженні. За результатами скринінгу 40 здорових добровольців відповідали всім критеріям включення/невключення (середній вік — 32,8±10,1 роки). Тридцять сім добровольців завершили участь в дослідженні, тоді як 3 добровольця достроково вибули у зв’язку з розвитком ПЯ. З них два добровольця прийняли 1 таблетку референтного препарату (20 мг аторвастатину) в І періоді дослідження, а один — по 1 таблетці референтного і тестового препарату (по 20 мг аторвастатину) у І і ІІ періодах. Розподіл добровольців в ході даного дослідження представлено на рис. 2.

Рисунок 2. Розподіл добровольців в дослідженні з доведення біоеквівалентності лікарського засобу Вазоклін-Дарниця референтному лікарському засобу Ліпримар®

*ПЯ — побічне явище; не пов’язано з прийомом досліджуваного лікарського засобу.

Оценка биоэквивалентности

До аналізу фармакокінетики було включено дані від добровольців, які завершили участь у дослідженні згідно Протоколу (n=37). За результатами визначення індивідуальних концентрацій аторвастатину в плазмі крові добровольців після прийому тестового і референтного лікарських засобів у всіх чотирьох періодах дослідження отримано наступні усереднені криві залежності «концентрація–час» (рис. 3).

Рисунок 3. Усереднені криві залежності «концентрація–час» для генеричного лікарського засобу Вазоклін-Дарниця та референтного лікарського засобу Ліпримар® (n=37)

На основі індивідуальних концентрацій аторвастатину в плазмі крові добровольців було розраховано всі основні параметри фармакокінетики та другорядні параметри, які підтверджують біоеквівалентність лікарських засобів (табл. 1).

Таблиця 1. Фармакокінетичні параметри для аторвастатину у здорових добровольців після одноразового прийому генеричного лікарського засобу Вазоклін-Дарниця та референтного лікарського засобу Ліпримар® (середнє ± стандартне відхилення) (n=37)

Препараты

Сmax,
нг/мл

Tmax,
год

AUC0–t,
нг‧ч/мл

AUC0–∞,
нг‧ч/мл

Kel, ч-1

T½,
ч

Вазоклин-Дарница

6,739±
4,276

0,874±
0,762

31,873±

28,789

37,511±
29,142

0,08757±
0,04501

9,883±
5,264

Липримарâ

7,172± 4,053

0,841± 0,624

29,279± 19,311

34,121±
19,675

0,09783±
0,09623

9,155± 4,028

Сmax — максимальної концентрація аторвастатину в плазмі крові; Tmax — час досягнення Сmax; AUC0–t — площа під фармакокінетичною кривою з моменту прийому лікарського засобу до останньої точки, що визначається; AUC0–∞ — площа під фармакокінетичною кривою, екстрапольована до нескінченності; Kel — константа швидкості елімінації; T½ — період напіввиведення.

Розраховані межі 90% довірчих інтервалів для відношення геометричних середніх значень Cmax та AUC0-t для лікарських засобів Вазоклін-Дарниця та Ліпримар® становили 81,15%–102,66% та 94,09%–111,09%, відповідно. Отже, отримані числові значення задовольняють критерій біоеквівалентності (80,00%–125,00%) для AUC0-t та Cmax для аторвастатину (табл. 2). Межі 90% довірчого інтервалу для відношення геометричних середніх AUC0-∞ для досліджуваних лікарських засобів (95,86%–113,35%) також відповідають критерію прийнятності щодо біоеквівалентності.

Таблиця 2. Оцінка 90% довірчих інтервалів для відмінностей між генеричним лікарським засобом Вазоклін-Дарниця та референтним лікарським засобом Ліпримар®

Параметр

Геометрическое среднее, LSM

Нижняя граница 90% ДИ (%)

Отношение T/R (%)

Верхняя граница 90% ДИ (%)

Вывод о БЕ

n

T

n

R

AUC0–t,
нг·ч/мл

37

24,775

37

24,233

94,09

102,24

111,09

ТАК

Cmax,
нг/мл

37

5,625

37

6,163

81,15

91,27

102,66

ДА

БЕ — біоеквівалентність; ДИ — довірчий інтервал; AUC0–t — площа під фармакокінетичною кривою з моменту прийому лікарського засобу до останньої точки, що визначається; Сmax — максимальної концентрація аторвастатину в плазмі крові; n — кількість добровольців, включена в аналіз; LSM — метод найменших квадратів; Т — тестовий лікарський засіб Вазоклін-Дарниця; R — референтний лікарський засіб Ліпримар®.

Отже, ґрунтуючись на результатах аналізу Cmax та AUC0-t аторвастатину в здорових добровольців, можна зробити висновок, що генеричний лікарський засіб Вазоклін-Дарниця, таблетки, вкриті оболонкою, по 20 мг аторвастатину, виробництва ПрАТ «Фармацевтична фірма «Дарниця» є біоеквівалентним референтному лікарському засобу Ліпримар®, таблетки, вкриті плівковою оболонкою, по 20 мг аторвастатину, виробництва «Пфайзер Менюфекчуринг Дойчленд ГмбХ» (Німеччина).

Анализ переносимости

К анализу переносимости были включены данные всех добровольцев, получивших хотя бы одну дозу исследуемых препаратов (n = 40). После приема здоровыми добровольцами лекарственных средств в разовой дозе 20 мг аторвастатина зарегистрировано 5 случаев ПР у 5 добровольцев (головная боль [n = 3] и повышение активности КФК в плазме крови [n = 2]). Частота ПР после приема тестового и референтного лекарственных средств была сходной и составляла 3 и 2 случая соответственно. Все зарегистрированные случаи ПР расценивались как предполагаемые ПР (указанные в инструкции по медицинскому применению препарата Липримар®), были несерьезными, легкой и средней степени тяжести и не требовали проведения лечения.

Также в ходе исследования было зарегистрировано 3 ПЯ у 3 добровольцев (повышение температуры тела [n = 3], острое респираторное заболевание, острый назофарингит [n = 1]), в результате чего добровольцы были исключены из исследования. Все случаи ПЯ были несерьезными, легкой степени тяжести, терапия ПЯ не проводилась.

Таким образом, анализ результатов обследования 40 здоровых добровольцев в ходе данного исследования свидетельствует о сравнительной переносимости после однократного приема (в рамках каждой последовательности) лекарственных средств Вазоклин-Дарница, таблетки, покрытые оболочкой 20 мг аторвастатина, производства ЧАО «Фармацевтическая фирма «Дарница» (Украина) и Липримар®, таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 20 мг аторвастатина, производства «Пфайзер Менюфекчуринг Шпрехензидуева ГмбХ» (Германия).

Выводы

По результатам проведенного с соблюдением международных стандартов клинического исследования с участием здоровых добровольцев доказано биоэквивалентность лекарственного средства Вазоклин-Дарница, таблетки, покрытые оболочкой 20 мг аторвастатина (в виде аторвастатина кальция), производства ЧАО «Фармацевтическая фирма «Дарница» референтному лекарственному средству Липримар® , таблетки, покрытые пленочной оболочкой, 20 мг аторвастатина (в виде аторвастатина кальция), производства «Пфайзер Менюфекчуринг Шпрехензидуева ГмбХ» (Германия).

По данным клинического испытания оба лекарственные средства характеризовались образным профилем безопасности в условиях однократного приема здоровыми добровольцами натощак.

Спонсор исследования ЧАО «Фармацевтическая фирма «Дарница» выражает благодарность сотрудникам медицинского центра ООО «Клиника ИННОФАР - Украина Инновейтив Фарма Ресерч» (Украина) и Биоаналитическая лаборатории ООО «Клинфарм» (Украина), которые внесли свой вклад в проведение исследования и обработку его результатов.